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作者
谢云鹏雷旭琴宋婕李晓娜贺瑞杨继忠冯鹏飞
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单位
太原理工大学生物医学工程学院山西省眼科医院准分子激光室山西省眼科医院角膜病科
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摘要
圆锥角膜是以角膜中央变薄、向前突出成圆锥形为特征的一种角膜疾病，胶原代谢异常是其发病原因之一。通过探究乙酰唑胺药物对圆锥角膜成纤维细胞胶原合成的影响及机制，为圆锥角膜疾病的临床治疗提供新思路。采用100μmol/L乙酰唑胺溶液处理人圆锥角膜成纤维细胞，采用qPCR方法检测处理后胶原代谢基因的表达，分别采用ELISA、Western Blot检测总胶原及I型胶原的含量，采用荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS水平，采用分光光度法检测MDA含量及细胞总抗氧化能力T-AOC的变化。结果发现，乙酰唑胺处理后，圆锥角膜细胞中胶原合成及交联酶编码基因COLs、LOXs的表达显著升高，MMP2、MMP3、MMP9等胶原降解基因的表达均显著下降，I型胶原和总胶原含量降低。此外，细胞内抗氧化酶基因NQO-1表达升高，总抗氧化能力增强，ROS和MDA含量显著下降。结果表明，乙酰唑胺通过调节圆锥角膜成纤维细胞氧化应激水平，改善胶原的合成及交联，抑制胶原降解。
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关键词
乙酰唑胺圆锥角膜胶原氧化应激
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基金项目(Foundation)
国家自然科学基金资助项目(11872262,12072218,12002233)；山西省自然科学基金资助项目(20210302123096)；
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文章目录
1 材料与方法
1.1 圆锥角膜成纤维细胞的提取及培养
1.2 乙酰唑胺药物处理
1.3 实时荧光定量PCR( qPCR )检测基因表达
1.4 胶原含量检测
1.5 细胞内氧化应激水平检测
1.6 数据分析
2 实验结果
2.1 乙酰唑胺调节圆锥角膜成纤维细胞胶原代谢相关基因的表达
2.2 乙酰唑胺提高圆锥角膜成纤维细胞中胶原蛋白的含量
2.3 乙酰唑胺抑制圆锥角膜成纤维细胞内氧化应激水平
3 讨论
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引用格式
谢云鹏,雷旭琴,宋婕,李晓娜,贺瑞,杨继忠,冯鹏飞.乙酰唑胺对圆锥角膜成纤维细胞胶原代谢的影响[J].太原理工大学学报,2023,54(01):186-192.DOI:10.16355/j.cnki.issn1007-9432tyut.2023.01.022.
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